干货！移液器的介绍及使用方法

介绍：

移液器又称移液枪，是一种用于定量转移液体的器具。在进行分析测试方面的研究时，一般采用移液器(pipette)移取少量或微量的液体。

基本构造：

移液器在临床实验室中因为基本结构简单，使用方便等原因而得到广泛应用。其基本结构主要有显示窗、容量调节部件、活塞、0-形环、吸引管和吸头(吸液嘴)等几个部分。

工作原理：

临床常用的微量移液器的设计依据是胡克定律：即在一定限度内弹簧伸展的长力与弹力成正比，也就是移液器内的液体体积与移液器内的弹簧弹力成正比。

微量移液器加样的物理学原理有两种：使用空气垫加样和使用无空气垫的活塞正移动(positivedisplacement)加样。这两种不同原理的微量移液器有其不同的特定应用范围。
移液器的分类：
根据原理可分为气体活塞式移液器(Air-displacement pipette)和外置活塞式移液器(Positive-displacement pipette)。气体活塞式移液器主要用于标准移液，外置活塞式移液器主要用于处理易挥发、易腐蚀及粘稠等特殊液体。
移液器的使用：
1.量程的调节
在调节量程时，如果要从大体积调为小体积，则按照正常的调节方法，逆时针旋转旋钮即可;但如果要从小体积调为大体积时，则可先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度，再回调至设定体积，这样可以保证量取的最高精确度。在该过程中，千万不要将按钮旋出量程，否则会卡住内部机械装置而损坏了移液枪。
2.枪头(吸液嘴)的装配：
在将枪头(pipette tips)套上移液枪时，很多人会使劲地在枪头盒子上敲几下，这时错误的做法，因为这样会导致移液枪的内部配件(如弹簧)因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散，甚至会导致刻度调节旋钮卡住。正确的方法是将移液枪(器)垂直插入枪头中，稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合。如果是多道(如8道或12道)移液枪，则可以将移液枪的第一道对准第一个枪头，然后倾斜地插入，往前后方向摇动即可卡紧。枪头卡紧的标志是略为超过O型环，并可以看到连接部分形成清晰的密封圈。
3.移液的方法：
移液之前，要保证移液器、枪头和液体处于相同温度。吸取液体时，移液器保持竖直状态，将枪头插入液面下2-3毫米。在吸液之前，可以先吸放几次液体以润湿吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或密度与水不同的液体时)。这时可以采取两种移液方法。
一是前进移液法。用大拇指将按钮按下至第一停点，然后慢慢松开按钮回原点。接着将按钮按至第一停点排出液体，稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余的液体。最后松开按钮。
二是反向移液法。此法一般用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体，其原理就是先吸入多于设置量程的液体，转移液体的时候不用吹出残余的液体。先按下按钮至第二停点，慢慢松开按钮至原点。接着将按钮按至第一停点排出设置好量程的液体，继续保持按住按钮位于第一停点(千万别再往下按)，取下有残留液体的枪头，弃之。
4.移液器的正确放置：
使用完毕，可以将其竖直挂在移液枪架上，但要小心别掉下来。当移液器枪头里有液体时，切勿将移液器水平放置或倒置，以免液体倒流腐蚀活塞弹簧。

使用方法：

1.选择合适的移液器

移取标准溶液(如水、缓冲液、稀释的盐溶液和酸碱溶液)时多使用空气置换移液器，移取具有高挥发性、高黏稠度以及密度大于2.0g/cm的液体或者在临床聚合酶链反应(PCR)测定中的加样时使用正向置换移液器。如移取15ul的液体，最好选择最大量程为20ul的移液器，选择50ul及其以上量程的移液器都不够准确。

2.设定移液体积

调节移液器的移液体积控制旋钮进行移液量的设定。调节移液量时，应视体积大小而旋转刻度至超过设定体积的刻度，再回调至设定体积，以保证移取的最佳精确度。

3.装配吸头

使用单通道移液器时，将可调式移液器的嘴锥对准吸头管口，轻轻用力垂直下压使之装紧。使用多通道移液器时，将移液器的第一排对准第一个管嘴，倾斜插入，前后稍微摇动拧紧。

4.移液

保证移液器、吸头和待移取液体处于同一温度；然后用待移取吸液体润洗吸头1-2次，尤其是黏稠的液体或密度与水不同的液体。移取液体时，将吸头尖端垂直浸入液面以下2-3mm深度(严禁将吸头全部插入溶液中),缓慢均匀地松开操作杆，待吸头吸入溶液后静置2-3秒，并斜贴在容器壁上淌走吸头外壁多余的液体。

5. 移液器的放置

使用移液器完毕后，用大拇指按住吸头推杆向下压，安全退出吸头后将其容量调到标识的最大值，然后将移液器悬挂在专用的移液器架上；长期不用时应置于专用盒内。

移取方法：

1.前进移液法按下移液操作杆至第一停点位置，然后缓慢松开按钮回原点；接着将移液操作杆按至第一停点位置排出液体，稍停片刻继续将移液操作杆按至二停点位置排出残余液体，最后缓慢松开移液操作杆。

2.反向移液法先按下按钮至第二停点位置，慢慢松开移液操作杆回原点，排出液体时将移液操作杆按至第一停点位置排出设置好体积的液体，继续保持按住移液操作杆位于第一停点位置取下有残留液体的吸头而弃之。

注意事项：

1.在调节移液器的过程中，转动旋钮不可太快，也不能超出其最大或最小量程，否则易导致量不准确，并且易卡住内部机械装置而损坏移液器。

2.在装配吸头的过程中，用移液器反复强烈撞击吸头反而会拧不紧，长期如此操作，会导致移液器中零件松散，严重时会导致调节刻度的旋钮卡住。

3.当移液器吸头里有液体时，切勿将移液器水平放置或倒置，以免液体倒流而腐蚀活塞弹簧。

4.对移液器进行高温消毒时，应首先查阅所使用的移液器是否适合高温消毒后在进行处理。

维护保养：

移液器应根据使用频率进行定期维护，但至少每隔3个月维护一次，检查移液器是否有灰尘和污物，尤其注意其嘴锥部位。长期维护时需要清洁移液器内部，必须由经培训合格的人员拆卸 。

1.移液器的清洁

内部的清洁需要先拆卸移液器下半部分，拆卸下来的部件用肥皂水、洗洁精或60%异丙醇来擦洗，再用双蒸水冲洗，晾干，再在活塞表面用棉签涂上一层薄薄的起润滑作用的硅树脂；密封圈一般无需清洗。

2.移液器的消毒

可采用常规高温高压灭菌处理或紫外线照射灭菌进行消毒。3.移液器上污染核酸的去除将移液器下半部分拆卸下来的内、外套筒，在95℃清洗液中浸泡30分钟，再用双蒸水将套筒冲洗干净，60℃下烘干或完全晾干，最后在活塞表面涂上润滑剂(硅树脂)并将部件组装。

3.移液器上污染核酸的去除

将移液器下半部分拆卸下来的内、外套筒，在95℃清洗液中浸泡30分钟，再用双蒸水将套筒冲洗干净，60℃下烘干或完全晾干，最后在活塞表面涂上润滑剂(硅树脂)并将部件组装。

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