透析袋原理是什么？使用方法的详细介绍
一、透析的原理
透析只需要使用专用的半透膜即可完成。通常是将半透膜制成袋状，将生物大分子样品溶液置入袋内，将此透析袋浸入水或缓冲液中，样品溶液中大分子量的生物分子被截留在袋内，而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外，直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”，袋（膜）外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。
透析的动力是扩散压，扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度，正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度，还正比于膜的面积和温度，通常是 4℃透析，升高温度可加快透析速度。
二、透析的过程
1、把适量的透析液（缓冲液）加入透析装置。透析液的体积应为样品体积量的 100 倍。（例如，在 1L 透析液中透析 10 ml 的样品）
2、裁剪适当长度的透析管。预留一段额外长度（约占总样品体积量的 20%）作为头部空间。
3、把透析管插入打开的透析夹，在约超出透析夹 3-5 mm 的位置再夹住。不要折叠透析袋。
4、由透析管开口端将样品装入。调整一下顶部空间的长度，夹紧透析夹。
5、把透析样品放在合适的透析缓冲液中。
6、透析要根据具体的应用需求。通常情况下，允许过夜透析。在持续透析的过程中，至少要进行 3 次全部更换透析液。建议在（透析后）2-4 小时，6-8 小时和 10-14 小时（第二天早晨）更换透析液。在最后一次透析液的更换后，要至少继续进行 2 小时的透析。
7、透析温度主要取决于样品。温度最高限制主要取决于膜的类型。纤维素透析袋可以承受的温度高达 37℃。再生纤维素透析袋可以承受的温度高达 60℃。
注意：对于高浓度污染物，样品可能需要较长的时间透析，透析液需要更频繁的更换。
透析袋使用前的处理
方法一：把透析袋剪成适当长度（10-20 cm）的小段。在大体积（500 ml）的 2%（w/v）的碳酸氢钠和 1 mmol/L EDTA2Na（pH = 8.0）中将透析袋煮沸 10 min。用蒸馏水彻底清洗透析袋。放在 500 ml 的 1 mmol/L EDTA2Na（pH = 8.0）中将之煮沸 10 min。冷却后，置于 30% 或者 50% 的酒精中，放于 4℃ 冰箱，必须确保透析袋始终浸没在溶液内。从此时其取用透析袋必须戴手套。在使用前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗干净。
方法二：可先用 50%乙醇煮沸1h，再依次用 50%乙醇、0.01mol/L碳酸氢钠和 1mmol/L EDTA（pH=8.0）溶液洗涤，最后用蒸馏水冲洗即可使用。
方法三：实验要求不高的可以用简易方法处理。用沸水煮5至10min，再用蒸馏水洗净，即可使用。不过现在也有杂质含量极少，无需预处理，只需用去离子水清洗即可使用的即用型透析袋。这种透析袋具有特殊的生物技术膜，不含硫化物及金属杂质。只是比普通型透析袋稍贵。
透析袋浓缩样品大多数情况下，透析袋纯化的样品会被稀释。如果下游需要的样品浓度比较高时，可能需要对样品进行浓缩。透析袋本身浓缩的方法如下：
1、吹干浓缩法： 将蛋白溶液装入透析袋内，放在电风扇下吹。此法简单，但速度慢，且温度不能过高，最好不要超过 15℃。
2、透析袋浓缩法： 利用透析袋浓缩蛋白质溶液是应用最广的一种。将要浓缩的蛋白溶液放入透析袋（无透析袋可用玻璃纸代替），结扎，把高分子（6000-12000）聚合物如聚乙二醇（碳蜡）、聚乙/烯吡/咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。也可将吸水剂配成 30%-40% 浓度的溶液，将装有蛋白液的透析袋放入即可。吸水剂用过后，可放入温箱中烘干或自然干燥后，仍可再用。主要用于更换蛋白质的缓冲液，得有透析袋。不需要特殊的仪器。一般用得是 PEG20000 进行实验，简单，快速，对蛋白没什么影响。此外，还有其他的样品浓缩方法，如冷冻干燥浓缩法、超滤膜浓缩法等。
