干货！细胞培养板的注意事项、清洗步骤以及操作步骤

干货！细胞培养板的注意事项、清洗步骤以及操作步骤

细胞培养板，是一种生物学用具。
根据底部形状的不同可分为平底和圆底（U型和V 细胞培养板型）：
平底的什麽类型的细胞都可用﹐但当细胞数目较少﹐如做克隆时﹐就用96孔平底板﹐另外﹐做MTT等实验时﹐无论贴壁 和悬浮细胞﹐一般均用平底板。至于U或V型板﹐一般在某些特殊要求时才使用。如在免疫学方面﹐当做两种不同淋巴细胞溷合培养时﹐需要二者相互接触以刺激﹐ 因此﹐一般需要U型板﹐因细胞会由于重力的作用而聚集在一个很小的范围内。V型板的用途更少﹐一般用于细胞杀伤实验时﹐为了使效靶细胞紧密接触﹐常使用V 型板﹐但这种试验也可用U型板替代(加入细胞后﹐低速离心) 　如果是养细胞的话， 通常是选用平底的， 另外要特别注意材质，圆底的好像没听说过拿来养细胞。 圆底的通常是拿来做分析， 化学反应， 或是保存样品用的， 因为圆底比较好将液体吸得乾净，如果用平底的就不好吸了。 不过， 如果你是要测吸光值的话， 一定要买平底的才行。大部分细胞培养都用平底培养板，便于镜下观测、有明确的底面积、细胞培养液面高度相对一致，还便于MTT检测。
平底和圆底（U型和V型）培养板区别和选择：
不同形状的培养板有不同用途。培养细胞，通常是选用平底的，这样便于镜下观测、有明确的底面积、细胞培养液面高度相对一致。因此做MTT等实验时，无论是贴壁和悬浮细胞，一般选用平底板。测吸光值一定要使用平底的培养板。要特别注意材质， 标示“Tissue Culture (TC) Treated”是养细胞用的。
U型或V型板，一般在某些特殊要求时才使用。如在免疫学方面，当做两种不同淋巴细胞混合培养时，需要二者相互接触刺激，这时一般会选用U型板，因为细胞会由于重力的作用而聚集在很小的范围内内。圆底培养板还会用于同位素掺入的实验，需要用细胞收集仪收集细胞的培养，如“混合淋巴细胞培养”等。V型板常用做细胞杀伤、免疫学血凝集实验。细胞杀伤这种实验也可用U型板替代（加入细胞后，低速离心）。
多孔细胞培养板是一种用于细胞培养的实验室用品，通过其多孔的表面可以让细胞黏附并生长，通常用于细胞的分离、扩增和实验室研究等方面。
例如，多孔细胞培养板的作用：
1.可以用于细胞分离和单克隆细胞的制备；
2.可以用于细胞扩增和培养；
3.可以用于细胞实验和研究，如细胞增殖、转化和凋亡等。
多孔细胞培养板的操作步骤（仅供参考）：
1．加样品：将标本稀释液100ul（或2滴）加到包被板内（预留阴阳性及空白对照2－5孔），将待检血清用PBS或生理盐水按1：20稀释后取10ul加入反应孔内。
2．加对照：加入阴性对照1－3孔，阳性对照1孔，各100ul对照血清。空白对照1孔空置。
3．温育：将反应板震荡使样品混匀后，置37℃温箱或水浴反应20分钟。
4．洗板：用蒸馏水将浓缩洗涤液15ml稀释至300ml。（1）手洗：将反应板孔内容物倾出，将洗涤液注满反应孔，放置30秒钟后用力甩去，如此重复5次后拍干。（2）机洗：5次，每孔注入洗涤液200ul或注满，停留30秒钟后吸尽拍干。
5．加酶标工作液：每孔加入100ul（或2滴）酶标工作液，置37℃温箱反应20分钟后，洗板5次，洗板操作同步骤4。
6．显色和终止反应：将底物A、B液各50ul（或1滴）加到反应孔内，37℃避光显色10分钟。每孔加入终止液50ul（或1滴）混匀终止反应。
细胞培养板清洗的基本步骤：
1.将使用过的细胞培养板放入培养皿中，加入适量的去离子水或去离子水和10%漂白水混合液，使其浸没在液体中。
2.在培养皿内的细胞培养板中加入少量的洗涤剂，轻轻搅拌，以使清洁液尽可能地覆盖整个培养板表面。
3.用自来水彻底冲洗培养板，确保清洁液和洗涤剂完全被冲洗干净，不留下任何残留物。
4.在清洗干净的水中彻底冲洗培养板，以去除任何残留的清洁剂或污垢。
5.将用干净的纸巾或棉签擦拭培养板表面和周围区域，确保它们完全干燥和无污染。
6.将已清洗的培养板装入干净的塑料袋或容器中，并储存于干燥的、无菌的环境中，以备下一次使用。
细胞培养板清洗的注意事项：
1.选择合适的清洗液和洗涤剂。一般来说，去离子水或去离子水和漂白水混合液是最常用的清洗液，而无香料、无色的洗涤剂It's the best choice。清洗液和洗涤剂的浓度和使用量也需要根据实际情况进行调整。
2.注意清洗时间和方法。清洗时间应该足够长，以确保清洗液和洗涤剂能够彻底地覆盖整个培养板表面，并清除任何污垢和残留物。清洗时应该轻轻搅拌，以避免对细胞造成任何损伤。
3.避免使用有毒的清洗剂或溶剂。有些清洗剂或溶剂可能会对细胞产生毒性影响，因此应该避免使用它们来清洗细胞培养板。
4.保持清洗工具和设备的干净和无菌。清洗过程中使用的棉签、纸巾、玻璃棒等工具和设备应该经过彻底的消毒和清洗，以避免对细胞造成任何污染。
5.定期更换细胞培养板。即使经过了彻底的清洗和消毒，细胞培养板仍然会存在一定的污染和损伤风险。因此，建议定期更换细胞培养板，以确保实验的准确性和可靠性。
细胞培养板清洗的常见问题及解决方法：
1.清洗后的培养板表面出现水渍或残留物。这可能是因为清洗液和洗涤剂没有彻底冲洗干净，或者清洗时间不够长。解决方法是重新清洗一遍，确保彻底冲洗干净。
2.培养板表面出现裂缝或划痕。这可能是因为使用了不当的清洗剂或溶剂，或者使用了过于粗糙的清洗工具。解决方法是使用适当的清洗液和洗涤剂，并使用柔软的纸巾或棉签轻轻擦拭。
3.使用培养板时出现细胞死亡或生长异常。这可能是因为细胞培养板没有彻底清洗，或者清洗时使用了有毒的清洗剂或溶剂。解决方法是重新清洗细胞培养板，并使用无毒的清洗剂或溶剂。
注：细胞培养板的清洗是细胞培养实验中非常重要的一步，它可以确保实验的准确性和可靠性。在清洗细胞培养板时，需要选择合适的清洗液和洗涤剂，并注意清洗时间和方法。同时，也需要保持清洗工具和设备的干净和无菌，以避免对细胞造成任何污染。如果出现任何问题，应该及时采取相应的措施，以保证实验的成功。

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