干货！脂质体 3000 转染试剂的制备、特点、转染细胞类型及注意事项

干货！脂质体 3000 转染试剂的制备、特点、转染细胞类型及注意事项

Invitrogen Lipofectamine 3000 转染试剂是一种用于细胞转染的高效试剂。它可以将外源 DNA、RNA 或 siRNA 有效地导入到多种哺乳动物细胞中，从而实现基因表达、基因沉默和基因编辑等研究。
脂质体 3000 是球形囊泡具有至少一个脂双层。所述脂质体可被用作一个药物递送媒介物给药的营养物和药品，如脂质纳米颗粒中的 mRNA 的疫苗，和 DNA 疫苗。脂质体可以通过破坏生物膜（例如通过超声处理）来制备。
脂质体是最经常由磷脂，特别是磷脂酰胆碱，但也可以包括其它脂类，如 Phosphatidylethanolamine，只要它们是兼容的脂质双层结构。脂质体设计可以使用表面配体来附着于不健康的组织。
脂质体的主要类型是多层囊泡（MLV，具有多个层状相脂质双层）、小单层脂质体囊泡（SUV，具有一个脂质双层）、大单层囊泡（LUV）和耳蜗囊泡。一种不太理想的形式是多囊脂质体，其中一个囊泡包含一个或多个较小的囊泡。
脂质体 3000 具有被疏水膜包围的水溶液核心，呈脂质双层的形式；溶解在核中的亲水性溶质不容易通过双层。疏水性化学物质与双层相关联。因此，脂质体可以装载疏水性和/或亲水性分子。为了将分子递送到作用部位，脂质双层可以与其他双层如细胞膜融合，从而递送脂质体内容物；然而，这是一个复杂且非自发的事件，不适用于营养物质和药物输送。通过在 DNA 或药物溶液中制备脂质体（通常无法通过膜扩散）它们可以（不加选择地）通过脂质双层传递。脂质体被用作人工细胞的模型。脂质体还可以设计为以其他方式输送药物。可以构建包含低（或高）pH 值的脂质体，使得溶解的水性药物将带电到溶液中（即，pH 值超出药物的 pI 范围）。由于脂质体内的 pH 值自然中和（质子可以穿过一些膜），药物也将被中和，使其可以自由穿过膜。这些脂质体通过扩散来传递药物而不是通过直接的细胞融合。然而，在此 pH 调节通道中的功效取决于所讨论药物的理化性质（例如 pKa 和具有碱性或酸性性质），这对于许多药物来说是非常低的。
通过注射具有跨膜 pH 梯度的空脂质体，可以在药物的生物解毒中利用类似的方法。在这种情况下，囊泡充当水槽以清除血液循环中的药物并防止其毒性作用。脂质体给药的另一种策略是靶向内吞作用。脂质体可以制成特定的大小范围，使其成为天然巨噬细胞吞噬作用的可行目标。这些脂质体在巨噬细胞的吞噬体中可能被消化，从而释放其药物。脂质体也可以用调理素和配体装饰，以激活其他细胞类型的内吞作用。
使用脂质体将 DNA 转化或转染到宿主细胞中被称为脂质转染。
除了基因和药物递送应用外，脂质体 3000 还可用作将染料递送至纺织品、杀虫剂至植物、酶和营养补充剂至食物以及化妆品至皮肤的载体。
脂质体酪胺 3000 转染试剂利用我们先进的脂质纳米颗粒技术提供卓岳的转染性能，改善应用结果和可重复的结果。
该试剂为广泛的难转染细胞和常见细胞（例如 HEK293、HeLa）提供卓岳的转染效率和改进的细胞活力。
使用具有以下特性的试剂成功转染各种生物学相关细胞类型：
卓岳的性能——我们用于难转染细胞的高效率试剂
提高细胞活力——对细胞温和，毒性低
多功能—一种用于 DNA、RNA 和共转染的试剂
其可高效转染的细胞类型包括:
成纤维细胞 (3T3、COS-7)、成肌细胞 (C2C12、L6 CRL-1458)、肝细胞 (HepG2、HuH7)、红白血病细胞 (K562)、乳腺癌 (MCF7、Hs578T)、前列腺癌 (LNCap)、肺癌细胞 (A549、NCI-H460)、骨肉瘤细胞 (U-2 OS、Saos-2)、结肠癌细胞 (Caco2、SW480)、胰腺癌细胞 (PANC-1)、皮肤黑色素瘤细胞 (SK-MEL-28)。经济高效地转染常规细胞对于常见的细胞种类而言，Lipofectamine3000 试剂相比其他试剂具有更高的浓度和更低的用量，从而为客户带来更好的性价比。1.5 mL 规格产品即足以完成最多 1500 次的转染反应 (24 孔板中)。在低毒条件下获得优异的转染效率 Lipofectamine3000 试剂的脂质体用量在很宽的动态范围内均能保持很高的转染效率，可按需进行简便快速的条件优化。在需要将细胞损伤降至最低的相关应用中，建议使用低毒的脂质体用量 (24 孔板每孔使用 0.75μL)。在新型基因组编辑的相关应用中获得高转染效率 Lipofectamine?3000 试剂适用于新型基因组编辑的相关应用。通过高效率的转染，它能够增加 TALEEN 或 CRISPR 系统剪切和重组的成功概率，最终使得基因修饰的效率实现最大化，并简化后续处理步骤。保存条件:2-8C 储存 12 个月。不可冻结。
Invitrogen Lipofectamine 3000 转染试剂是一种常用的转染试剂，用于将外源 DNA 或 RNA 导入细胞内。在使用该试剂时，需要注意以下事项：
1. 严格按照试剂说明书中的操作步骤进行操作，确保操作的准确性和可重复性。
2. 在使用前，确保试剂处于适当的温度和保存条件下。避免暴露于高温或冷冻的环境中。
3. 在使用前，检查试剂是否过期。过期的试剂可能会影响转染效果。
4. 在操作过程中，避免与皮肤和眼睛接触。如不慎接触，请立即用大量清水冲洗，并寻求医疗帮助。
5. 在转染前，确保细胞的健康状态。细胞应处于对转染试剂敏感的生长状态。
6. 在转染过程中，避免使用含有抗生素的培养基，以免影响转染效果。
7. 在转染后，根据实验需要选择适当的培养基和培养条件，以保证细胞的正常生长和表达。
8. 在使用过程中，注意遵守实验室的安全操作规范，确保实验室的安全性。
Invitrogen Lipofectamine 3000 转染试剂是一种常用于细胞转染的试剂。细胞转染是一种将外源 DNA、RNA 或蛋白质引入细胞内的技术，广泛应用于生物医学研究和临床应用中。
Lipofectamine 3000 转染试剂具有高效的转染效果和低细胞毒性，适用于多种细胞类型。它通过形成脂质体-核酸复合物，将外源核酸导入细胞内。该试剂具有独特的三组分配方，包括转染试剂、P3000 增效剂和 Lipofectamine 3000 转染缓冲液，可以提高转染效率和细胞存活率。
在临床应用中，Lipofectamine 3000 转染试剂可用于基因治疗、疫苗研发、药物筛选和细胞治疗等领域。例如，基因治疗是一种通过将正常基因导入患者体内来治疗遗传性疾病的方法。Lipofectamine 3000 转染试剂可以帮助将治疗基因导入患者的细胞中，从而实现基因治疗的目的。
此外，Lipofectamine 3000 转染试剂还可以用于研究细胞信号传导、基因表达调控和细胞功能研究等方面。通过将特定的 DNA、RNA 或蛋白质导入细胞内，研究人员可以探索细胞内分子的功能和相互作用，从而深入了解生物学过程和疾病机制。

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