SDS-PAGE Gel Preparation Kit

SDS-PAGE凝胶配制试剂盒

产品简介：

本公司提供的SDS-PAGE凝胶快速制备试剂盒包含凝胶制备所需的全部试剂。本试剂盒可配制至少50块常规大小的PAGE胶。

产品组分：

货号	名称	规格	保存条件
DA8461-1	30%Acr-Bis(29:1)	100 ml	4℃
DA8461-2	1M Tris-HCLpH8.8	100 ml	RT
DA8461-3	1M Tris-HCLpH6.8	15 ml	RT
DA8461-4	10% SDS	5 ml	RT
DA8461-5	APS(于粉)	0.5g	RT,配制后-20℃
DA8461-6	TEMED	0.5ml	4℃,避光
	说明书	一份

使用说明：

一、配制分离胶(各试剂使用量请参考表二)

根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度(表一),再按照下面的分离胶配方表(表二)配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶)。

表一不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围：

 

SDS-PAGE分离胶浓度	最佳分离范围
6%	50-150kD
8%	30-90kD
10%	20-80kD
12%	12-60kD
15%	10-40kD

配制分离胶前，根据以下配方准备10%APS;

10%APS配制(5ml);将0.5gAPS干粉溶于5ml灭菌水中，彻底溶解后分装，1 ml支，-20℃备存，每次取一管使用，10%APS应尽量减少室温存放时间，以防失效，

10%APS在4℃有效期为一用， -20℃有效期6个月，若发现凝胶聚合时间延长，应考虑更换使用-20度保存的10%APS,

制备分高胶步骤；

1、 参照凝胶模具说明书，装配好凝胶模具。

2、 按照表二将不同体积的成分在小烧杯或试管中混合；加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌 使其沉匀，避免产生气泡，

3、在凝胶模具中滥入适量分离胶溶液(对于mini-gcl,凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5 cm 成距梳齿约0.5 cm即可),然后在分离胶溶液上轻轻覆益一层1-5 cm的水层，使凝胶表面保 持平整、

4、 静置15-20分钟，待分离胶和水层之间出现一个清听的界面后，说明凝胶已聚合。

 

表二SDS-PAGE分离胶配方表

 

组分	不同凝胶体积对应各组份的取样量(ml)
6%胶	5ml	10ml	15ml	20ml
H₂O	2.05	4.1	6.15	8.2
1M Tris-HCLpH8.8	1.9	3.8	5.7	7.6
30% Acr-Bis(29:1)	1	2	3	4
10% SDS	0.05	0.1	0.15	0.2
TEMED	0.005	0.01	0.015	0.02
10% APS	0.05	0.1	0.15	0.2
8%胶	5ml	10ml	15ml	20ml
H₂O	1.7	3.3	5	6.7
1M Tris-HCLpH8.8	1.9	3.8	5.7	7.6
30% Acr-Bis(29:1)	1.3	2.7	4	5.3
10% SDS	0.05	0.1	0.15	0.2
TEMED	0.005	0.01	0.015	0.02
10% APS	0.05	0.1	0.15	0.2
10%胶	5ml	10ml	15ml	20ml
H₂O	1.3	2.7	4	5.3
1M Tris-HCLpH8.8	1.9	3.8	5.7	7.6
30% Acr-Bis(29:1)	1.7	3.3	5	6.7
10% SDS	0.05	0.1	0.15	0.2

 

TEMED	0.005	0.01	0.015	0.02
10% APS	0.05	0.1	0.15	0.2
12%胶	5ml	10ml	15ml	20ml
H₂O	1	2	3	4
1M Tris-HCLpH8.8	1.9	3.8	5.7	7.6
30% Acr-Bis(29:1)	2	4	6	8
10% SDS	0.05	0.1	0.15	0.2
TEMED	0.003	0.006	0.009	0.012
10% APS	0.05	0.1	0.15	0.2
15%胶	5ml	10ml	15ml	20ml
H₂O	0.5	1	1.5	2
1M Tris-HCLpH8.8	1.9	3.8	5.7	7.6
30% Acr-Bis(29:1)	2.5	5	7.5	10
10% SDS	0.05	0.1	0.15	0.2
TEMED	0.003	0.006	0.009	0.012
10% APS	0.05	0.1	0.15	0.2

二、浓 缩 胶 制 备：

1、去除覆盖在分离胶上的水层。

2、按照表三将不同体积成分在一个小烧杯或试管中混合；加入10%APS和TEMED,轻轻授 拌使其混匀，避免产生气泡。

3、将浓缩胶溶液加至分离胶的上面，直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。

4、将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。

5、静置30-40分钟，等待浓缩胶聚合。

表三SDS-PAGE浓缩胶(4%)配方表

 

组份	不同凝胶体积对应各组份的取样量(ml)
	2ml	4ml	5ml	10ml
H₂O	1.4	2.7	4.1	6.8
1MTris-HCLpH6.8	0.25	0.5	0.75	1.25
30% Acr-Bis(29:1)	0.33	0.67	1	1.7
10% SDS	0.02	0.04	0.06	0.1
TEMED	0.002	0.004	0.006	0.01
10% APS	0.02	0.04	0.05	0.1

 

注意事项：

1、凝胶的聚合时间与环境温度有关。夏天温度较高时，聚合较快；冬天气温低时，聚合 时间会延长。可以根据环境温度的不同调节APS的加入量。

2、本产品仅限于专业人员科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

3、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件：

按照标签所示保存，有效期一年；常温运输。

产品编号	名称	包装	品牌
P0012A	SDS-PAGE凝胶配制试剂盒	1盒	碧云天
O0600	SDS-PAGE凝胶配制试剂盒	50T	麦格

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