透析袋膜材料的耐酸碱性,透析袋如何选择？

一、透析

透析就是利用小分子能够通过，而大分子不能够通过半透膜的原理，将大小

分子量物质分开的一种实验手段；在膜两侧存在浓度差时，溶质从高浓度的一侧 （通常是样品置于透析袋中）扩散通过半透膜到低浓度的一侧（透析溶液一侧） 直至膜两边浓度达到平衡。如下图所示：

 

 

利用透析分离物质的优缺点：

优点：样品回收率高；操作简单，无需繁琐准备工作；成本低廉，可一次性使用； 分离条件温和；无需监控

缺点：耗时较长（24-48 小时）；要求较为明显的样品和杂质之间的分子量差（1-2 个数量级）。

 

二、三种不同类型的透析袋

1 、普通型透析袋

如：

MD34-3.5-5m   普通型透析袋（3500）       34mm        5 米/卷     现货 

此类型透析袋可以耐受的 pH 范围是 5.0~9.0；可以接触的溶剂见文章最后的表格此外还需要复杂的预处理：

（1）把透析袋剪成适当长度（10-20cm）的小段；

（2）在大体积的 2%(W/V)碳酸氢钠和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10 分钟；

（3）用蒸馏水彻底清洗透析袋；

（4）放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸 10 分钟；

（5）冷却后，存放于 4 度，必须确保透析袋始终浸没在溶液内。从此时起取用 透析袋是必须戴手套；

（6）用前在透析袋内装满水然后排出，将之清洗干净；

2. 再生纤维素透析袋:

如：

128118-1m         再生纤维素透析袋（10000）       18mm, 1. 1ml/cm       1 米/卷     现货 

此类型透析袋可耐受 pH 范围是 2.0~ 12.0；耐受温度是 4~60℃；可以接触的溶剂见文章最后的表格。不能煮，也不需要煮，只需用纯水彻底冲洗即可。

3.纤维素透析袋:

如：

131204-1m      纤维素透析袋（5000）         31mm,3. 1ML／CM          1 米/卷     现货 

此类型透析袋可耐受 pH 范围是 2.0~9.0；耐受温度是 4~37℃；可以接触的溶剂见文章最后的表格。不能煮，也不需要煮，只需用纯水彻底冲洗即可。

三、透析袋的选择

1.  确定透析袋的分子量

128118-1m         再生纤维素透析袋（10000）       18mm, 1. 1ml/cm       1 米/卷     现货 

以这款透析袋为例，括号中的 10000 就是这个货号透析袋的截留分子量。此截留分子量的含义是：如果将分子量为 10000 的物质放入该透析袋中，90%以上会保 留在透析袋中。

在选择适合截留分子量之前，首先要明确：欲保留在透析袋中的样品和想要 除去的杂质的分子量。

 

这张图横坐标是样品分子量，纵坐标是保留率，蓝色，橙色和绿色分别代表了 20kD ，50kD 和 100kD 的透析袋。

比如分子量 10kD 的样品，如果选择了 20kD 的透析袋，在图中可以看出，它的保留率大概是 83% ，只透出去 17%；如果选择了 50kD 的透析袋，它的保留 率大概是 69% ，只透出去31%；如果选择了 100kD 的透析袋，它的保留率大概 是 28% ，只透出去 72%。

试验表明，如果想将杂质尽可能的都透出去，需要选择的分子量至少是杂质分子量的 100 倍；比如杂质分子量是 1kD ，选择 100kD 的透析袋最好，杂质会  除去的很干净；比如维生素 B12（分子量 1.3kD）和牛 IgG 蛋白（分子量 150kD）， 如果选择 130kD 分子量的透析袋，就可以将维生素 B12 除去的很干净，同时对  于牛 IgG 蛋白（分子量 150kD）来说，也是 90%以上的保留在透析袋中；但是兼 顾实际，没有 130kD 的透析袋，只有最接近的 100kD 的透析袋，所以就可以选  择 100kD 的透析袋，也可以达到很好的分离效果。

但是，实验人员想要分离开的两个物质往往分子量差，达不到 100 倍，甚至只有 10 倍左右的差别。比如维生素 B12（分子量 1.3kD）和细胞色素 C（分子量 12kD），这个情况，如果再选择 100kD 的透析袋，那么要保留的细胞色素 C只有 27%左右的保留率，损失太大；如果选择 20kD 的透析袋，细胞色素 C 的保留 率是 88%左右，但是维生素 B12 会有 12%的残留在透析袋中；如果选择 50kD 的 透析袋， 细胞色素 C 的保留率只有 76%左右，但是维生素 B12 只有 2%残留在 透析袋中了。所以，在杂质和样品的分子量相差不够大时，考虑想除去杂质更多一些，即使样品有些损失，还是想更多的保留样品，即使杂质去除的不够干净也 可以，综合考虑，选择合适的分子量。

如果杂质和样品分子量相差太小，比如杂质分子量 1kD ，样品分子量只有 2kD ，这种情况，就不合适用透析袋分离了。

2.  选择普通型，再生型，or 纤维素透析袋

确定好分子量之后，根据实际情况，样品溶剂等，选择透析袋

3.  正确选择扁平宽度

透析袋扁平宽度的选择取决于样品体积和透析容量。较小的透析管透析更快；较大的透析管因扩散距离较长透析较慢。为易于使用，建议使用总长（包括 闭合夹和顶部空间）为大约 10-15cm 的透析袋。

128118-1m     再生纤维素透析袋（10000）         18mm, 1. 1ml/cm        1 米/卷            现货

这款透析袋的扁平宽度是 18mm，后面的 1. 1ml/cm  指的是每 1cm 长度的透析袋，可以装 1. 1ml 体积的样品量。

四、透析袋的使用

下述透析程序是一个普遍的基础透析过程。在开始透析之前应考虑到许多变数。透析样品溶剂、膜的化学相容性、膜的截留分子量，透析溶剂、透析体积、 温度等变量都会影响透析速率，因此，一些应用中下述透析过程可能需要适当的变化：

a. 把适量的透析液（缓冲液）加入透析装置。透析液的体积应为样品体积量的 100 倍。（例如：在一升透析液中透析 10 毫升的样品）；

b. 裁剪适当长度的透析管。预留一段额外长度（约占总样品体积量的20%） 作为头部空间；

c. 把透析管插入打开的透析夹，在约超出透析夹 3-5 毫米的位置再夹住。 不要折叠透析袋；

d. 由透析管开口端将样品装入。调整一下顶部空间的长度，夹紧透析夹；

e. 把透析样品放在合适的透析缓冲液中；

f. 透析要根据具体的应用需求。通常情况下，允许过夜透析。在持续透析的过程中，至少要进行 3 次全部更换透析液。建议在（透析后）2-4 小时，6-8 小时和 10-14小时（第 2天早晨）更换透析液。在最后一次透析液的更换后要至少继续进行 2小时的透析。

五、使用注意事项

a.  透析袋不能在纯水中长期储存，会长菌，用 0.05%叠/氮/化/钠溶液储存；

b.  样品按推荐的单位长度容量加样，不可多加，样品浓度不可太大，否则容易导致膜涨破；

c.  样品和透析液体积比一般是 1:50~500；

d.  对于高浓度污染物，样品可能需要较长的时间透析，透析液需要更频繁的更换；

e.  透析温度主要取决于样品。温度限制主要取决于膜的类型。纤维素透析袋可以承受的温度高达37℃ , 再生纤维素透析袋可以承受的温度高达60℃。

六、使用注意事项

在适当的储存情条件下，保质期为两年。干燥的透析袋要在室温或 4℃储存在聚乙/烯袋中。一旦变湿，透析袋应浸泡在下列之一的溶液中：0.05%叠/氮/化/钠， 1%苯甲酸钠或 1%甲醛。（备注：一旦变潮湿，不要让透析袋干燥。不断干燥会 造成孔隙结构不可恢复的倒塌）

表 1-5  膜材料的耐酸碱性和有机抗性

R：推荐； L：有限接触；NR：不推荐

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